{"id":1277,"date":"2019-09-18T09:35:39","date_gmt":"2019-09-18T09:35:39","guid":{"rendered":"https:\/\/novanta.com\/it\/precision-manufacturing\/senza-categoria\/4-consigli-per-ottenere-immagini-di-alta-qualita-nelle-applicazioni-di-microscopia\/"},"modified":"2019-09-18T09:35:39","modified_gmt":"2019-09-18T09:35:39","slug":"4-consigli-per-ottenere-immagini-di-alta-qualita-nelle-applicazioni-di-microscopia","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/novanta.com\/it\/precision-manufacturing\/articoli\/blog\/4-consigli-per-ottenere-immagini-di-alta-qualita-nelle-applicazioni-di-microscopia\/","title":{"rendered":"4 consigli per ottenere immagini di alta qualit\u00e0 nelle applicazioni di microscopia"},"content":{"rendered":"\n<p class=\"wp-block-paragraph\">La microscopia \u00e8 una tecnica importante in numerose discipline, sia nel campo della ricerca che in quello commerciale. Esistono molte tecniche di microscopia in uso. Alcune di queste includono: la microscopia confocale a ponte, la microscopia a foglio di luce reticolare e la microscopia multifotonica.\u00a0 <\/p>\n\n\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Per tutte queste tecniche, la risoluzione dell\u2019immagine \u00e8 un fattore chiave. La risoluzione gioca un ruolo fondamentale nel successo della microscopia, poich\u00e9 si riferisce alla capacit\u00e0 del microscopio di cogliere i dettagli del campione. <\/p>\n\n\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">I progressi quotidiani in queste tecniche contribuiscono a spingere ulteriormente i limiti della risoluzione dell\u2019immagine, evitando al contempo di danneggiare il campione. Oggi esamineremo alcuni suggerimenti su come ottenere immagini di alta qualit\u00e0 utilizzando apparecchiature di supporto quali i laser e la tecnologia di scansione laser.<\/p>\n\n\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\" id=\"h-high-power-range-of-wavelengths\">Elevata potenza, ampia gamma di lunghezze d\u2019onda<\/h2>\n\n\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Per ottenere la massima risoluzione, il primo passo consiste nell\u2019individuare una sorgente laser adeguata.  Nella microscopia a fluorescenza, i ricercatori utilizzano coloranti quali cianina, atto e azo per identificare la presenza, la posizione e la concentrazione di molecole specifiche.\u00a0 Ogni colorante presenta una lunghezza d\u2019onda di eccitazione di picco, in cui la fluorescenza raggiunge il massimo per una data potenza di eccitazione. L\u2019utilizzo di un laser il pi\u00f9 possibile in linea con questa lunghezza d\u2019onda di picco migliora l\u2019efficienza, riducendo il riscaldamento del campione. Ci\u00f2 aumenta anche le velocit\u00e0 di acquisizione delle immagini raggiungibili nelle applicazioni ad alta produttivit\u00e0, oppure la luminosit\u00e0 dell\u2019immagine in condizioni di scarsa illuminazione. <\/p>\n\n\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Nella microscopia a esaurimento dell\u2019emissione stimolata (STED), le immagini a super-risoluzione, ovvero immagini che superano la risoluzione limitata dalla diffrazione, vengono generate impiegando un secondo laser per disattivare selettivamente i fluorofori vicini al punto focale del laser di eccitazione.\u00a0 Ci\u00f2 riduce al minimo l\u2019area illuminata, portandola ben al di sotto della dimensione dello spot del laser di eccitazione.  Ci\u00f2 aumenta la risoluzione ottenibile. <\/p>\n\n\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Il livello di potenza laser richiesto per la microscopia dipende da molti fattori.  Tra questi figurano le dimensioni dell\u2019area del campione, il tipo di campione, la velocit\u00e0 di acquisizione richiesta e la tecnica microscopica impiegata. Trovare il giusto equilibrio tra luminosit\u00e0 dell\u2019immagine e durata del campione pu\u00f2 risultare impegnativo.\u00a0 L\u2019accesso a un\u2019ampia gamma di potenze massime e la possibilit\u00e0 di variare continuamente la potenza al di sotto di tale valore massimo sono strumenti fondamentali per ottimizzare la propria configurazione. \u00a0<\/p>\n\n\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\" id=\"high-speed-imaging\">Acquisizione di immagini ad alta velocit\u00e0<\/h2>\n\n\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Altri fattori chiave da considerare, oltre al tipo di laser e alle lunghezze d\u2019onda, riguardano la soluzione di scansione. \u00c8 importante scegliere una soluzione di scansione che consenta di ottenere la frequenza dei fotogrammi e il campo visivo desiderati grazie alla velocit\u00e0 di scansione e all\u2019angolo dei componenti di orientamento del fascio. Ecco perch\u00e9 la scelta dei giusti componenti di orientamento del fascio \u00e8 fondamentale per lo sviluppo di ogni sistema di microscopia. Cambridge Technology offre componenti di orientamento del raggio, quali galvanometri e scanner risonanti, molto apprezzati nel campo della microscopia sia per le prestazioni che per l\u2019affidabilit\u00e0 a lungo termine. <\/p>\n\n\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">I galvanometri sono da sempre la scelta pi\u00f9 diffusa grazie al loro controllo preciso della velocit\u00e0 e della posizione. Ci\u00f2 offre la flessibilit\u00e0 necessaria per regolare la frequenza e gli schemi di scansione in base alla tecnica microscopica impiegata. <\/p>\n\n\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Con il progresso delle scienze della vita e la necessit\u00e0 di osservare movimenti rapidi e morfologie all\u2019interno di cellule e tessuti, per l\u2019imaging in vivo sono auspicabili velocit\u00e0 di scansione ancora pi\u00f9 elevate. Ci\u00f2 \u00e8 reso possibile dal<a href=\"https:\/\/novantaphotonics.com\/product\/crs-resonant-scanners\/\" target=\"_blank\" rel=\"noreferrer noopener\">nostro scanner risonante CRS<\/a>. Il CRS oscilla a una frequenza risonante fissa, pi\u00f9 di 10 volte pi\u00f9 veloce rispetto ai galvanometri standard.\u00a0 Sebbene meno flessibile nella variet\u00e0 dei tipi di scansione, l\u2019ottimizzazione del CRS per la scansione ad alta velocit\u00e0 consente ai sistemi di microscopia di raggiungere oltre centinaia di fotogrammi al secondo. \u00a0<\/p>\n\n\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\" id=\"tightly-focused-focal-spot\">Punto focale strettamente concentrato<\/h2>\n\n\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Un altro aspetto da considerare per migliorare la risoluzione \u00e8 la dimensione del punto focale del laser.<sub>Un laser TEM00<\/sub>altamente focalizzato con un<sup>M2<\/sup>vicino all\u2019unit\u00e0 pu\u00f2 essere focalizzato su una dimensione del punto che si avvicina al limite di diffrazione di poche centinaia di nanometri (a seconda della lunghezza d\u2019onda e dell\u2019apertura numerica), con un profilo di intensit\u00e0 gaussiano facilmente modellabile, consentendo la massima risoluzione dell\u2019immagine possibile e una semplice interpretazione dei risultati. Un punto focale ben concentrato consente inoltre una scansione punto a punto dell\u2019immagine ad alta precisione, portando ancora una volta a una risoluzione migliorata. <\/p>\n\n\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Analogamente, nella microscopia a due fotoni, l\u2019eccitazione del campione si basa sul processo di assorbimento a due fotoni, che dipende dall\u2019intensit\u00e0. L\u2019assorbimento a due fotoni \u00e8 altamente localizzato nella regione focale del fascio di eccitazione; pertanto, ottenere un\u2019area focale ristretta attraverso la scelta di un laser di eccitazione con un M2 vicino all\u2019unit\u00e0 consente di generare immagini con la massima risoluzione.<\/p>\n\n\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\" id=\"easy-integration-due-to-long-operational-lifetimes-and-compact-size\">Facile integrazione grazie alla lunga durata operativa e alle dimensioni compatte<\/h2>\n\n\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Come per qualsiasi sistema, la facilit\u00e0 di integrazione e la lunga durata operativa sono requisiti imprescindibili. Nella microscopia, data l\u2019ingombro ridotto tipico del settore, \u00e8 indispensabile disporre di una soluzione dalle dimensioni compatte. Un laser e una soluzione di scansione laser in grado di soddisfare tutti questi requisiti contribuiranno alle prestazioni complessive del sistema, compreso il raggiungimento di immagini di alta qualit\u00e0 per un lungo periodo di tempo. <\/p>\n\n\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Ad esempio,<a href=\"https:\/\/novantaphotonics.com\/product\/gem-solid-state-continuous-wave-lasers\/\" target=\"_blank\" rel=\"noreferrer noopener\">i laser di Laser Quantum presentano un tempo medio tra i guasti (MTTF)<\/a>che supera in media le 400.000 ore di utilizzo. Anche la tecnologia di scansione laser di Cambridge Technology offre affidabilit\u00e0 con durate estremamente lunghe in una variet\u00e0 di ambienti. <\/p>\n\n\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Aggiungendo una tecnologia dalle dimensioni compatte e dall\u2019elevata adattabilit\u00e0, gli utenti potranno ottenere una facile integrazione nelle apparecchiature OEM, soddisfacendo cos\u00ec l\u2019importante esigenza di compatibilit\u00e0 e facilit\u00e0 d\u2019uso.<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>La microscopia \u00e8 una tecnica importante in numerose discipline, sia nel campo della ricerca che in quello commerciale. Esistono molte tecniche di microscopia in uso. 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